Ce este LEUCEMIA ACUTĂ?
Leucemia acută este rezultatul unei serii de evenimente mutaționale care apar la nivelul unui precursor hematopoietic timpuriu, împiedicând urmașii acelui precursor să se maturizeze normal, dar permițându-le să prolifereze într-un mod necontrolat. Rezultatul este expansiunea rapidă a unei populații imature de celule mieloide (în leucemia mieloidă acută [LMA]) sau limfoide (în leucemia limfocitară acută [LLA]) care înlocuiesc măduva osoasă normală, ducând la pierderea producției de globule roșii, leucocite și trombocite normale. În cele din urmă, celulele leucemice evadează din măduvă în fluxul sanguin și se acumulează în ganglionii limfatici, splină și organele normale. Dacă nu este tratată, leucemia acută este de obicei fatală în câteva luni.
Rata de incidență a leucemiei ajustată în funcție de vârstă în Statele Unite este de 12,8 la 100.000 de persoane în fiecare an. Prevalența leucemiei este în general mai mare la persoanele albe și la bărbați și crește odată cu vârsta. Aproximativ una din 70 de persoane dezvoltă leucemie în timpul vieții.
Ce sunt BLAȘTII?
Blaștii sunt celule nediferențiate care posedă capacitatea de auto-înnoire și potențial de maturare către liniile celulare specifice (mieloidă sau limfoidă). În condiții fiziologice, aceștia constituie mai puțin de 5% din celularitatea nucleată a măduvei osoase și sunt absenți în sângele periferic.
Prezența blaștilor în sângele periferic (leucocitemie) sau creșterea lor peste pragul de 20% în măduvă este markerul definitoriu pentru leucemiile acute, conform clasificării Organizației Mondiale a Sănătății (OMS). Acest fenomen reflectă o „oprire în maturație” (blockade of differentiation), unde celulele se multiplică necontrolat fără a atinge stadiul de celulă funcțională.
DxH 900 este cel mai nou analizor de hematologie disponibil de la Beckman Coulter. Acesta este capabil să efectueze o hemoleucogramă (CBC) cu o tehnologie sofisticată, îmbunătățind precizia identificării trombocitelor (PLT), a numărului diferențial de leucocite (WBC), a globulelor roșii (RBC), a granulocitelor imature (IG) și a globulelor roșii nucleate (NRBC). Modulul CBC se bazează pe principiul Coulter îmbunătățit, utilizând impedanță digitală cu numărare triplă, votare și flux de baleiaj pentru a preveni recircularea celulelor în spatele aperturii. Numărul diferențial de WBC, numărul de NBRC și identificarea IG sunt efectuate cu tehnologia VCSn (V: volum; C: conductivitate; S: diagramă de dispersie), care aplică mai multe măsurători fizice fiecărei celule în parte. Aceste măsurători includ impedanța pentru a obține volumul celular, conductivitatea în curent de radiofrecvență pentru a analiza compoziția internă a celulei și raportul nucleu-citoplasmă și cinci măsurători de împrăștiere a luminii pentru a obține informații despre granularitatea celulară. Celulele sunt analizate în stare aproape nativă, într-un mediu cât mai apropiat de corpul uman și fără nicio colorare. Sistemul de semnalizare DxH 900 pentru prezența celulelor anormale se bazează pe mai mulți algoritmi, inclusiv analiza de tip „snake” și potrivirea șablonului. Tehnologia DxH 900 oferă o analiză celulară detaliată cu 70 de date morfometrice celulare (CMD), care pot fi utilizate în regulile de decizie pentru a îmbunătăți capacitățile analizorului de screening patologic. Fuziunea datelor crește încrederea în rezultate și îmbunătățește semnalizarea, eliminând necesitatea reluărilor.
Datele privind populația celulară (CPD) sunt parametri morfologici noi, inclusiv volumul, conductivitatea și cinci caracteristici de împrăștiere a luminii, utilizați pentru clasificarea leucocitelor de către analizorul de hematologie automat DxH 900.
Subclasificarea leucemiei acute este foarte complexă și ia în considerare informațiile obținute din diverse tehnici de laborator, cum ar fi examinarea morfologică a blaștilor leucemici, revizuirea probelor de biopsie a măduvei osoase, imunofenotiparea prin citometrie în flux și identificarea anomaliilor citogenetice și moleculare specifice. Utilizând arsenale de diagnostic, hematopatologii și clinicienii sunt capabili să prezică prognosticul bolii pentru fiecare pacient, să evalueze probabilitatea recidivelor și să ofere o terapie mai țintită.
În mijlocul unor teste complexe, o parte a investigațiilor de rutină pentru un pacient nou diagnosticat este hemoleucograma completă cu numărătoare diferențială (CBC-diff) prin intermediul unor analizoare de hematologie automate cu diferite soluții tehnologice pentru recunoașterea diferitelor tipuri de leucocite (WBC).
Timp de mulți ani, examinarea microscopică a tuturor probelor de sânge a fost o practică de rutină și, prin urmare, a permis comunității medicale să acumuleze un volum vast de cunoștințe despre modul în care celulele se schimbă în diverse stări de boală. Laboratoarele s-au confruntat cu un volum de muncă tot mai mare și presiuni economice în ultimele decenii. Odată cu apariția analizoarelor automate de celule capabile să raporteze o diferență CBC-diff, utilizarea diagnostică a informațiilor morfologice a scăzut constant. Astăzi, doar o minoritate de probe de sânge sunt efectiv examinate la microscop.
Același lucru este valabil și în ceea ce privește diagnosticul diferențial al diferitelor subtipuri de leucemie acută. Din punct de vedere istoric, subclasificarea blaștilor în linie limfoidă sau mieloidă s-a bazat predominant pe morfologie, ca să nu mai vorbim de identificarea leucemiei promielocitare. Limitările serioase ale acestui standard de îngrijire nu pot fi supraestimate. Analiza morfologică este subiectivă și depinde în mare măsură de experiența personală a evaluatorului, iar identificarea caracteristicilor fie în linia limfoidă, fie în cea mieloidă este puțin reproductibilă. În plus, numărul de blaști analizați este limitat la câteva sute de celule. Dintr-o perspectivă practică, aceasta este o abordare care necesită foarte mult timp și este costisitoare. Fiind metoda standard pentru subclasificarea leucemiei acute, morfologia a fost în mare parte înlocuită inițial prin citochimie și ulterior prin imunofenotipizare prin citometrie în flux.
Un studiu realizat de Jin Hyuk Yang și colab. a prezentat rezultate promițătoare în ceea ce privește diagnosticul diferențial al diferitelor subtipuri de leucemie acută, întrucât au reușit să identifice cu o oarecare precizie linia cazurilor necunoscute de leucemie acută (sensibilitate 85,1 – 100%), utilizând doar date dintr-o hemoleucogramă completă (CBC-diff) de rutină obținută cu noul analizorul de hematologie de la Beckman Coulter. Ei au reușit, de asemenea, să clasifice toate cazurile de leucemie promielocitară acută atât în setul de testare, cât și în cel de validare.
Leucemia promielocitară acută este o urgență hematologică, iar orice întârziere în tratament poate avea consecințe devastatoare din cauza coagulopatiei severe asociate cu acumularea de promielocite anormale. Coagulopatia este vindecabilă prin utilizarea acidului retinoic all- trans în marea majoritate a cazurilor. Uneori, tratamentele pentru leucemia promielocitară acută sunt inițiate exclusiv pe baza analizei morfologice, iar în multe situații, inducerea este amânată până când sunt disponibile rezultatele genetice, punând astfel pacientul într-un risc serios. Ar putea fi liniștitor pentru medic faptul că utilizarea modelelor CPD (date despre populația celulară), obținute pe analizoarele automate de hematologie, permite o analiză morfologică blastică pentru a identifica cazurile de leucemie promielocitară acută cu o sensibilitate și specificitate de 100%, în special varianta hipogranulară a leucemiei promielocitară acută.
Același studiu a mai arătat cum morfologia leucocitelor (WBC) ar putea juca în continuare un rol crucial în diagnosticul bolilor hematologice, utilizând tehnologiile moderne disponibile pe analizoarele de hematologie pentru a evalua aceste caracteristici morfologice într-un mod automat, cantitativ, rapid și ieftin. În loc să analizeze 100 sau 200 de celule la microscop, DxH 900 examinează 8.192 de leucocite în câteva secunde, evaluând cantitativ caracteristicile morfologice ale volumului celular, granularității citoplasmatice, complexității nucleare și densității interne printr-un sistem de puncte, CPD. Avantajele unei analize cantitative nu constau doar în faptul că interpretarea rezultatelor este simplă și poate fi automatizată printr-un set de reguli de decizie numerică, ci și în faptul că se pot implementa strategii de screening, prin care probele sunt semnalizate dacă se încadrează în afara unui set de criterii CPD alese de patolog. Prin abordarea subclasificării timpurii a cazurilor de leucemie acută, acest studiu a demonstrat o potențială aplicație clinică utilizând acești parametri morfologici.
Acum, că noile tehnologii în domeniul analizoarelor de hematologie sunt capabile să furnizeze cantități vaste de date morfologice în timpul unei hemograme complete simple, datele analizate folosind software-ul pot arunca o nouă lumină asupra valorii și puterii lor.
În concluzie, acest studiu a relevat o nouă soluție pentru evaluarea morfologiei blaștilor și prezicerea originii acestora utilizând informații obținute la o diferență constantă a hemoleucogramei complete (CBC-diff). Această descoperire poate fi de o importanță critică în obținerea unui diagnostic și tratament mai rapid și mai precis al pacienților nou diagnosticați cu leucemie acută, în special în situațiile în care testele moderne, cum ar fi citometria în flux, nu sunt disponibile.
Surse:
Hanah Kim, Mina Hur*, Jong-Ho Yi, Gun-Hyuk Lee, Seungho Lee, Hee-Won Moon and Yeo-Min Yun - Detection of blasts using flags and cell population
data rules on Beckman Coulter DxH 900 hematology analyzer in patients with hematologic diseases, Clin Chem Lab Med 2024;
Jin Hyuk Yang1, Yonggoo Kim2, Jihyang Lim2, Myungshin Kim2, Eun-Jee Oh2, Hae-Kyung Lee2, Yeon-Joon Park2, Woo Sung Min3, Bin Cho4, Kwangyoung Lee5, and Kyungja Han2 - Determination of Acute Leukemia Lineage with New Morphologic Parameters Available in the Complete Blood Cell Count, Annals of Clinical & Laboratory Science, 2014;
Maite Serrando Querol 1,2,* , Javier Nieto-Moragas 1,2 , Anna Marull Arnall 1,2, Meritxell Deulofeu Figueras 1,2 and Orlando Jiménez-Romero 1,2 - Evaluation of the New Beckmann Coulter Analyzer DxH 900 Compared to Sysmex XN20: Analytical Performance and Flagging Efficiency, Diagnostics (MDPI).
